TEMA: Asociación genética de la variante RS12041331 del gen pear 1, con la hiperagregación plaquetaria en pacientes con enfermedad cerebrovascular isquémica.
OBJETIVO: Establecer la relación entre la variante RS12041331
del gen PEAR 1, la agregación plaquetaria y su posible influencia en la ECV isquémica y así poder establecer un protocolo de diagnóstico que facilite la detección
temprana, que le permita al médico tomar medidas de pre-tratamiento y al paciente
reevaluar sus hábitos de vida.
MUESTRA: Prueba de sangre.
ÁCIDO NUCLEICO: ADN HUMANO
ADN polimerasa
EXTRACCIÓN DE ÁCIDO NUCLEICO: LISIS
CENTRIFUGACIÓN
CROMATOGRAFÍA
GEN: PEAR 1 : 150 pb
Serpina10: 128 pb
PCR: PCR-RFLP (Polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción)
Desnaturalización: 68-90 °C x 10-120 segundos.
Alineamiento: 37 - 65 °C x10 a 120 segundos.
Replicación o Elongación: 75 y 90 °C x 3 minutos.
En esta fase la Taq ADN polimerasa
elonga los cebadores, empleando como molde ambas hebras originales. La
replicación ocurre en dirección 3´-5´a partir del extremo 3´-OH de cada cebador,
empleando como sustrato cuatro dNTPs, hasta terminar la lectura del molde o
hasta comenzar un nuevo ciclo.
VISUALIZACIÓN: Electroforesis (EFO)
REFERENCIA:
Ing. biomédica. UCES. Isaza. A. (Internet). Recuperado del sitio web: https://repository.eia.edu.co/bitstream/11190/2007/1/IsazaAlejandra_2015_AsociacionGeneticaVariante.pdf
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